Главное меню

ПРЕИМПЛАНТАЦИОННЫЙ ГЕНЕТИЧЕСКИЙ СКРИНИНГ

на основе технологии GenetiSure (Agilent, США)

Преимплантационный генетический скрининг (ПГС) - диагностическая процедура, предназначенная для увеличения эффективности ЭКО (экстракорпоральное оплодотворение).

ПГС – современный метод выявления хромосомных и генных аномалий у эмбриона до переноса его в полость матки. Проводится по рекомендации врача или по желанию пациентов в рамках цикла ЭКО.

Ещё до переноса эмбриона в матку с помощью ПГС стало возможным устранять риск появления на свет ребенка с генетическими заболеваниями, связанными с нарушением числа хромосом, структурными нарушениями в самих хромосомах или повреждением отдельных генов (моногенные заболевания). По статистике у тех, кто делал ПГС эмбриона в программах ЭКО, реже бывают замершие беременности или прерывания на ранних сроках. Это объясняется тем, что для имплантации в матку отбираются только эмбрионы без хромосомных и генных аномалий.

Показания к проведению ПГС:

  • Наличие наследственных заболеваний у одного или обоих супругов;
  • Наличие наследственных заболеваний у родственников (в том числе проявляющихся в зрелом возрасте);
  • Наличие наследственных заболеваний у детей;
  • Наличие в анамнезе замершей беременности или нескольких невынашиваний беременности (двух и более выкидышей);
  • Неудачные попытки ЭКО (более двух);
  • Тяжёлые нарушения сперматогенеза у мужчин;
  • Женщины в возрасте старше 35 лет;
  • Мужчины в возрасте старше 39 лет.

Преимущества ПГС перед другими генетическими исследованиями:

  • высокая достоверность метода;
  • проведение исследования до переноса эмбрионов в матку;
  • выбор для переноса только генетически здоровых эмбрионов;
  • снижает риск невынашивания беременности;
  • повышает вероятность успешной имплантации эмбриона;
  • помогает определить причину прошлых неудачных попыток ЭКО;
  • позволяет снизить до минимума риск появления ребенка с врождённой патологией: наследственными заболеваниями, нарушениями развития плода и врождёнными пороками развития ребёнка;
  • снижает риск развития многоплодной беременности.

Для проведения ПГС сегодня используют различные молекулярно-генетические методы - ПЦР, флуоресцентную гибридизацию in situ (FISH), сравнительную геномную гибридизацию на микрочипах (aCGH), NGS секвенирование.

В основе GenetiSure лежит технология микрочипов Agilent Technologies. Метод был введен в клиническую практику позже ПЦР и, благодаря возможности скрининга с высоким разрешением одновременно всего набора хромосом, дополнил и расширил возможности существующих методов.

ПГС на основе технологии GenetiSure помогает решить основную проблему при проведении ЭКО: с возрастом пациентки количество эмбрионов, которые не несут анеуплоидий, катастрофически уменьшается. Практическое применение показывает увеличение частоты наступления клинической беременности при использовании ПГС в среднем на 44%.

На сегодняшний день решения Agilent Technologies для ПГС активно используются во всем мире.

Основные достоинства GenetiSure:

- Скрининг всех хромосом с разрешением, превосходящим широко используемые методы.

- Диагностика эмбрионов на 3 или 5 день развития.

- Протокол позволяет получить результат через 8 часов.

- Формат микрочипов позволяет проводить анализ 14 эмбрионов одновременно, и обеспечивает лучшее ценовое предложение на рынке.

- GenetiSure - комплексное решение, включает в себя микрочипы и все необходимые реагенты для проведения анализа.
ПРИМЕР ЗАКЛЮЧЕНИЯ
(научный вариант)
Государственное бюджетное учреждение здравоохранения
Детская городская клиническая больница города Краснодара
министерства здравоохранения Краснодарского края
(ГБУЗ «ДГКБ г. Краснодара» МЗ КК)
Центр репродуктивной клеточной медицины
350012, г. Краснодар, ул. им. Ак. Лукьяненко П.П., д.97, тел. 8(861)222-46-02
Ф.И.О:          Пациент
Пол:             ххххххх                                                            Полис: хххххххххххххх
Адрес:         ххххххх           моб. тел.: хххххххх                  Дата рождения: хххххххххххх
Дата поступления образца: хххххххх

Вид научного
исследования:
Преимплантационный генетический скрининг (ПГС) методом сравнительной геномной гибридизации (Array-CGH)
Исследование выполнено с помощью набора микрочипов для преимплантационного генетического скрининга GenetiSure Pre-Screen Array, 8×60K фирмы Agilent Technologies, USA и программного обеспечения CytoGenomics v.5.0. Материал анализа – трофэктодерма.

ИНФОРМАЦИЯ О НАУЧНОМ ИССЛЕДОВАНИИ

Значительная доля неудачных исходов программ вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) объясняется наличием различных хромосомных аномалий у переносимых эмбрионов. На сегодняшний день сравнительная геномная гибридизация на микрочипах (aCGH) – единственный метод, позволяющий диагностировать численные и структурные несбалансированные аномалии во всех 23 парах хромосом. Минимальным материалом для выполнения предимплантационной генетической диагностики (ПГД) может быть одна единственная клетка: полярное тельце, бластомер на 3-й день развития, а также биопсийный материал трофэктодермы, полученный на 5-й день. Преимуществом данного метода является высокая разрешающая способность (более чем в 1000 раз по сравнению традиционным кариотипированием), одновременный скрининг всех хромосом (что невозможно при FISH-диагностике), возможность количественной детекции с максимальной объективностью результата, получаемого в кратчайшие сроки (1-2 суток). Помимо желания женщины, показаниями для проведения ПГД являются старший репродуктивный возраст, две и более неудачные попытки ЭКО, невынашивание беременности в анамнезе, генетические нарушения или носительство "тяжелых" генных мутаций с выраженной генетической направленностью у родителей, случаи рождения детей с наследственной или врожденной патологией в анамнезе, серьезные нарушения сперматогенеза у мужчины и др.


РЕЗУЛЬТАТ ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследование выполнено по результатам отбора бластомеров из четырнадцати развивающихся эмбрионов на стадии 3-го дня дробления.

№ эмбриона Результат array-CGH* Заключение
1 Хаотичный хромосомный набор Выявлены множественные анеуплоидии
2 arr(1-22)×2,(XY)×1 Численных хромосомных нарушений не обнаружено
3 arr(1-22)×2,(XY)×1 Численных хромосомных нарушений не обнаружено
4 arr(1-22)×2,(XY)×1 Численных хромосомных нарушений не обнаружено
5 arr(1-22)×2,(XY)×1 Численных хромосомных нарушений не обнаружено
6 Хаотичный хромосомный набор Выявлены множественные анеуплоидии
7 Хаотичный хромосомный набор Выявлены множественные анеуплоидии
8 arr(1-22)×2,(X)×2 Численных хромосомных нарушений не обнаружено
9 arr(1-22)×2,(XY)×1 Численных хромосомных нарушений не обнаружено
10 arr(1-22)×2,(X)×2 Численных хромосомных нарушений не обнаружено
11 arr(1-22)×2,(XY)×1 Численных хромосомных нарушений не обнаружено
12 arr(1-22)×2,(XY)×1 Численных хромосомных нарушений не обнаружено
13 arr(1-22)×2,(XY)×1 Численных хромосомных нарушений не обнаружено
14 arr(1-22)×2,(XY)×1 Численных хромосомных нарушений не обнаружено
*В соответствии с рекомендациями Международной цитогенетической номенклатуры хромосом человека – ISCN 2016: An International System for Human Cytogenomic Nomenclature (J. McGowan-Jordan, A. Simons, M. Schmid .ISBN 978-3-318-05857-4)

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Эмбрионы без генетической патологии №: 2, 3, 4, 5, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14.

Внимание! В силу ограничений использованного метода анализа проведенное исследование не исключает эмбрионального мозаицизма, триплоидии, носительства сбалансированных хромосомных перестроек, а также микроделеций и/или микродупликаций. В случае наступления беременности рекомендуется проведение пренатальной диагностики в первом триместре с целью исключения хромосомной патологии плода.

Эмбрион №1 – Класс 8А

Профили сравнительной геномной гибридизации (aCGH) для эмбриона №1.
Хаотичный хромосомный набор.
Эмбрион №2 – Класс 8А

Профили сравнительной геномной гибридизации (aCGH) для эмбриона №2.
Сбалансированный хромосомный набор.
Эмбрион №3 – Класс 8B

Профили сравнительной геномной гибридизации (aCGH) для эмбриона №3.
Сбалансированный хромосомный набор.
Эмбрион №4 – Класс 6С

Профили сравнительной геномной гибридизации (aCGH) для эмбриона №4.
Несбалансированный хромосомный набор по 4 и 21 хромосомам.
Эмбрион №5 – Класс 8А

Профили сравнительной геномной гибридизации (aCGH) для эмбриона №1.
Сбалансированный хромосомный набор.
Эмбрион №6 – Класс 9В

Профили сравнительной геномной гибридизации (aCGH) для эмбриона №2.
Хаотичный хромосомный набор.
Эмбрион №7 – Класс 8В

Профили сравнительной геномной гибридизации (aCGH) для эмбриона №3.
Хаотичный хромосомный набор.
Эмбрион №8 – Класс 9А

Профили сравнительной геномной гибридизации (aCGH) для эмбриона №4.
Сбалансированный хромосомный набор.
Эмбрион №9 – Класс 8Б

Профили сравнительной геномной гибридизации (aCGH) для эмбриона №1.
Сбалансированный хромосомный набор.
Эмбрион №10 – Класс 8А

Профили сравнительной геномной гибридизации (aCGH) для эмбриона №2.
Сбалансированный хромосомный набор
Эмбрион №11 – Класс 8А

Профили сравнительной геномной гибридизации (aCGH) для эмбриона №3.
Сбалансированный хромосомный набор.
Эмбрион №12 – Класс 9В

Профили сравнительной геномной гибридизации (aCGH) для эмбриона №4.
Несбалансированный хромосомный набор по 4 и 21 хромосомам.
Эмбрион №13 – Класс 8В

Профили сравнительной геномной гибридизации (aCGH) для эмбриона №1.
Сбалансированный хромосомный набор.
Эмбрион №14 – Класс 8А

Профили сравнительной геномной гибридизации (aCGH) для эмбриона №2.
Сбалансированный хромосомный набор.
Исполнитель: ХХХХХХХХ
Дата выдачи результатов: ХХХХХ
ПУБЛИКАЦИИ

Гудков Г.В., Филиппов Е.Ф., Тен Ф.П., Крутенко Д.В., Тарасов Я.В., Курелинок С.А., Пивень А.В., Демченко Л.С. Возможность определения однонуклеотидных полиморфизмов и HLA-генотипирования эмбрионов на основании генетического материала бластомеров в программах преимплантационного скрининга // Научный журнал КубГАУ [Электронный ресурс]. – Краснодар: КубГАУ, 2017 . – №10(134). – Режим доступа: http://ej.kubagro.ru/2017/10/pdf/08.pdf , 1,000 у.п.л. – IDA [article ID]: 1341710008. http://dx.doi.org/10.21515/1990-4665-134-008