Вероятность рождения ребенка с хромосомной болезнью оценивается:
- в возрасте 30 лет как 1/385
- в возрасте 40 лет как 1/63
- в возрасте 45 лет как 1/19
Центр ЭКО с собственной лабораторией репродуктивной и клеточной медицины, помимо уже всем известным технологиям ЭКО, внедрил в свою работу уникальную методику преимплантационной генетической диагностики (ПГД) на микрочипах aCGH (array Comparative Genomic Hybridisation).
Молекулярное кариотипирование высокого разрешения на микрочипах, позволяет диагностировать хромосомные аномалии одновременно во всех хромосомах в единичной клетке эмбриона.
Благодаря данной технологии в программах ЭКО производится "подсадка" исключительно генетически здорового эмбриона, что существенно повышает вероятность наступления беременности и рождения здорового ребенка.
Как проводится ПГД?
Проведение предимплантационной генетической диагностики возможно только в цикле ЭКО/ИКСИ. Связано это с тем, что во время стандартного ЭКО к яйцеклетке добавляют большое количество мужских половых клеток, и во время забора материала в анализ могут попасть не только клетки эмбриона, но части сперматозоидов, не участвовавших в оплодотворении.
Клеточная биопсия при ПГД может проводиться на разных этапах:
1. Биопсия полярного тельца на стадии яйцеклетки/зиготы
2. Биопсия на стадии дробления: 6-10-клеточный эмбрион
3. Биопсия клеток эмбриона на стадии бластоцисты.
При биопсии полярного тельца исследуются только хромосомы матери. Метод используется в том случае, если генный фактор наследуется по женской линии. Такой анализ позволяет определить, здорова ли яйцеклетка, без ее повреждения. Если она не имеет дефектов, то ее оплодотворяют и переносят в матку.
Стадии взятия биопсийного материала
Биопсия на стадии дробления (третий день развития) состоит в исследовании 1-2 удаленных клеток-бластомеров. В то время, пока проводится диагностика, эмбрионы продолжают развиваться, и на пятые сутки развития самые «качественные» из них переносятся в матку.
Исследование эмбрионов на стадии бластоцисты проводятся повторно в тех случаях, если результаты, полученные на стадии дробления, сомнительны. Достаточно часто сначала проводится анализ полярных телец, а затем и бластомеров, что повышает точность диагностики.
Необходимость проведения ПГД не вносит существенных изменений в план лечения пациентов в протоколе ЭКО, поскольку все дополнительные манипуляции осуществляются в лаборатории. Однако для проведения ЭКО с ПГД требуется большое число эмбрионов, поэтому стимуляция яичников женщины может быть более активной.
Кандидатами на ПГД становятся семейные пары, у которых значительно повышен риск передачи потомству серьезных генетических проблем. Целями ПГД могут быть:
- снижение риска рождения ребенка с генетическими аномалиями у носителей генных заболеваний
- выявление эмбрионов с генетической предрасположенностью к тяжелым болезням «отсев» эмбрионов с аномалиями кариотипа
- выявление причин отсутствия имплантации в предыдущих попытках ЭКО
- проведение НLA-типирования для подбора будущего ребенка в качестве донора больному брату или сестре
- определение пола для предотвращения дальнейшей передачи заболеваний, сцепленных с полом
- определение резус-принадлежности для исключения развития у ребенка гемолитической болезни.
При этом основными показаниями к проведению ПГД являются:
- возраст родителей (матери – старше 35, отца – старше 40 лет).
- носительство генетических и хромосомных патологий в половых клетках серьезные нарушения сперматогенеза (олигозооспермия, азооспермия, олигоастенотератозооспермия).
- наличие двух и более неудачных попыток ЭКО
- привычное невынашивание беременности (более двух самопроизвольных выкидышей)
- смерть детей от предыдущих беременностей в результате резус-конфликта.
Технология преимплантационного скрининга с помощью микрочипов aCGH (Comparative Genomic Hybridisation)
- Одновременный скрининг всех хромосом.
- Высокая разрешающая способность ( >1000 раз с по сравнению кариотипированием).
- Возможность количественной детекции участков хромосом и однородительских дисомий.
- Возможность использовать биопсийный материал на разных стадиях (полярное тельце, бластомер, трофэктодерма).
- Объективные и достоверные данные, почти исключающие ошибку.
- Сокращенные сроки получения результата (1-3 сут)
- Отличная воспроизводимость анализа между лабораториями.
- Во многих статьях в международной литературе данный метод описан как один из наиболее надежных.
Возможности aCGH
- Микроскопические хромосомные нарушения
– Анеуплоидия (включая мозаицизм)
– Несбалансированные транслокации
– Маркерные хромосомы - Субмикроскопические нарушения
– Микроделеционные/микродупликационные синдромы
– Несбалансированные субтеломерные перестройки (del, dup, der)
Делеции/дупликации (ниже границы чувствительности) - Результаты оцениваются совместно с методами классической цитогенетики
«Плюсы» и «минусы» ПГД
Данная диагностика проводится на том тапе развития эмбриона, когда его клетки еще не взяли на себя какие-либо функции нового организма и в дальнейшем безопасно могут быть замещены другими при делении. Биопсия не приводит к возникновению пороков у ребенка, а риск случайного повреждения зародыша составляет менее 1%. В полость матки с большой долей вероятности переносятся только здоровые эмбрионы, и вопроса о необходимости прерывания беременности из-за генетики в дальнейшем не возникает. Однако исследование не только не дает гарантий имплантации, но и несколько снижает вероятность наступления беременности в сравнении с обычной программой ЭКО. Так, согласно медицинской статистике, стандартный протокол ЭКО становится успешным в 35-40% случаев, а протокол с проведением ПГД – в 25-28%.
Кроме того, ПГД – это довольно дорогостоящая процедура, так как она представляет собой сложную работу специалистов, при которой используются дорогостоящие материалы и оборудование. В среднем, ее стоимость составляет сегодня около 100 000 рублей. Однако затрачиваемая сумма не сопоставима со стоимостью лечения и реабилитации детей, появившихся на свет с тяжелыми заболеваниями. Но главный минус ПГД в том, что этот вид исследования, как и многие другие, не дает 100% гарантии: его достоверность – примерно 95-97%. Степень возможного риска наступления беременности генетически больным плодом определяется для каждой пары индивидуально и обсуждается на генетической консультации.
Помимо этого, в некоторых случаях метод дает как ложноположительные, так и ложноотрицательные результаты. Так, у здорового эмбриона может быть диагностирована патология, а у больного — ее отсутствие. Поэтому при наступлении беременности даже после проведения ПГД рекомендуется пройти биопсию ворсин хориона или амниоцентез.
Пример заключения «Преимплантационный генетический скрининг»
